تعیین آللوتیپ ژن s-rnase و ناحیه پروموتری ژن mdmyb10 در چند ژنوتیپ سیب (mallus spp.)

سیب (malus spp.) یکی از رایج ترین درختان میوه و مهمترین درخت کشت شده در مناطق معتدله است. از نظر رنگ گوشت میوه، سیب دارای گوشت سفید تا قرمز است. سیب های گوشت قرمز اغلب بصورت وحشی و با فراوانی کم وجود دارند. وجود آنتوسیانین زیاد باعث قرمز بودن رنگ گوشت برخی از این سیب ها می باشد. تجمع آنتوسیانین اغلب به دلیل بیان بالای ژن mdmyb10 در بسیاری از بافت ها از جمله گوشت میوه سیب است. در مواردی نیز یک مکان ژنی پیوسته با آلل s3-rnase مسئول قرمزی رنگ گوشت میوه در بعضی از ژنوتیپ ها بوده است. برای تعیین مکانیسم قرمز بودن رنگ گوشت میوه در برخی ژنوتیپ های محلی و استفاده کاربردی از این اطلاعات در تحقیقات بعدی، این پژوهش با هدف تعیین آللوتیپ ژن s-rnase و ناحیه پروموتری فاکتور رونویسی ژن mdmyb10 در این ژنوتیپ ها انجام شده است. بدین منظور نمونه¬های برگی از ژنوتیپ های محلی سیب گوشت قرمز تهیه شد و پس از استخراج dna، آللوتیپ آنها از نظر ناحیه پروموتری ژن mdmyb10 و نیز وجود آلل s3-rnase با استفاده از تکنیک pcr و پرایمرهای اختصاصی نواحی ژنومی مورد نظر و نهایتا الکتروفورز قطعات تکثیر شده مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج نشان داد که رقم bud9، نمونه ورزقان، نمونه خلعت پوشان و نمونه میاندوآب در ناحیه پروموتری ژن myb10 ژنوتیپ r1r6 داشتند و از نظر ژنوتیب مکان ژنی خودناسازگاری s، دارای آلل s3-rnase بودند. بنابراین، می توان نمونه های مذکور را هیبریدی از ‘niedzwetzkyana’ دانست. ولی در نمونه کشت بافتی موجود در آزمایشگاه که دارای شاخه و برگ قرمز بوده ولی ژنوتیپ r1r1 را از خود نشان داد درحالی¬که واجد آلل s3-rnase بود، به نظر می رسد قرمز بودن این نمونه مربوط به مکان ژنی پیوسته با آلل s3 باشد. نمونه ایوند نیز دارای آلل s3-rnase بوده ولی از نظر ژنوتیپ ناحیه ی پروموتری mdmyb10 باند متفاوتی نشان داد.